29 Equipamento de cada laboratório de microbiologia deve ter

Objetiva estudar o funcionamento do Princípio e Operação dos Equipamentos utilizados no Laboratório de Microbiologia. Um moderno laboratório de microbiologia deve ser equipado com o seguinte equipamento.

1. Forno de Ar Quente para Esterilização:

É usado para esterilização de material de vidro, como tubos de ensaio, pipetas e placas de Petri. Essa esterilização a seco é feita apenas para artigos de vidro. Substâncias líquidas, como meios preparados e soluções salinas, não podem ser esterilizadas no forno, pois perdem água devido à evaporação.

Os copos são esterilizados a 180 ° C por 3 horas. Um forno (Figura 3.2) tem um controle de termostato, usando o qual a temperatura constante necessária pode ser obtida por tentativa e erro. A leitura do termostato é aproximada e a temperatura exata é lida pela introdução de um termômetro no forno ou em um termômetro embutido em forma de L.

Em um forno moderno (Figura 3.3), há um display de temperatura digital e um controlador automático de temperatura para ajustar a temperatura desejada com facilidade. O tempo é definido por um temporizador digital. Depois de carregar os copos, a porta está fechada e o forno ligado.

A temperatura necessária está definida. Depois de o forno atingir a temperatura definida, o tempo necessário de esterilização é definido no temporizador. O forno desliga-se automaticamente após o tempo definido. O forno só é aberto depois de a temperatura estar próxima da temperatura ambiente. Caso contrário, se a porta for aberta, enquanto o interior do forno ainda estiver muito quente, o ar frio poderá entrar e rachar o vidro.

2. Forno de Secagem:

Para a preparação de certos reagentes, os utensílios de vidro, após a devida limpeza e enxaguamento com água destilada, devem ser secos. Eles são secos dentro do forno de secagem a 100 ° C até que o material de vidro seque completamente.

3. Autoclave:

Autoclave é o núcleo de um laboratório de microbiologia. É usado não apenas para esterilizar substâncias líquidas, como meios preparados e soluções salinas (diluentes), mas também para esterilizar materiais de vidro, quando necessário.

Tem o mesmo princípio de funcionamento de uma panela de pressão doméstica. A temperatura máxima que pode ser obtida pela fervura da água em um recipiente aberto é de 100 ° C (ponto de ebulição da água).

Esta temperatura é suficiente para matar apenas os formadores de esporos, mas é difícil matar as bactérias formadoras de esporos a esta temperatura, pois elas escapam formando esporos resistentes ao calor. Demora muito tempo para matar os esporos a esta temperatura.

Por outro lado, quando a água é fervida em um recipiente fechado, devido ao aumento da pressão dentro dela, o ponto de ebulição eleva-se e a temperatura do vapor muito acima de 100 ° C pode ser obtida. Esta alta temperatura é necessária para matar todas as bactérias, incluindo os formadores de esporos resistentes ao calor. A temperatura do vapor aumenta com o aumento da pressão do vapor (Tabela 3.1).

Tabela 3.1: Temperaturas atingíveis em diferentes pressões de vapor:

Ao operar uma autoclave vertical padrão, (Figura 3.4) é despejada água suficiente nela. Se a água é muito menor, a parte inferior da autoclave fica seca durante o aquecimento e o aquecimento posterior a danifica.

Se tiver um elemento de aquecimento de água embutido, (Figura 3.5) o nível de água deve ser mantido acima do elemento. Por outro lado, se houver muita água, levará muito tempo para atingir a temperatura desejada.

Os materiais a serem esterilizados são cobertos com papel craft e dispostos em uma moldura de alumínio ou madeira mantida na parte inferior da autoclave, caso contrário, se os materiais permanecerem parcialmente submersos ou flutuando, eles caem durante a fervura e a água pode entrar. A autoclave é fechada hermeticamente apenas mantendo a válvula de liberação de vapor aberta.

Em seguida, é aquecido por chamas ou pelo elemento de aquecimento embutido. O ar dentro da autoclave deve escapar completamente através desta válvula. Quando o vapor de água é visto escapar pela válvula, ele é fechado.

A temperatura e a pressão no interior aumentam. O aumento de pressão é observado no disco de pressão. Geralmente a esterilização é feita a 121 ° C (uma pressão de 15 libras por polegada quadrada, ou seja, 15 psi) por 15 minutos. O tempo necessário é considerado a partir do momento em que a pressão de temperatura necessária é atingida.

Uma vez atingida a pressão de temperatura necessária, esta é mantida controlando a fonte de aquecimento. Após o tempo especificado (15 minutos), o aquecimento é descontinuado e a válvula de liberação de vapor ligeiramente aberta. Se totalmente aberto imediatamente, devido à queda repentina da pressão, os líquidos podem sair dos recipientes.

Gradualmente, a liberação de vapor é aberta mais e mais, de modo a permitir que todo o vapor escape. A autoclave é aberta somente depois que a pressão cai de volta à pressão atmosférica normal (0 psi). A autoclave nunca deve ser aberta, quando ainda há pressão no interior. Os materiais esterilizados a quente são removidos segurando-os com um pano limpo ou luvas de mão revestidas de amianto.

No caso de uma autoclave horizontal com camisa de vapor, uma caldeira produz o vapor (Figura 3.6). É liberado a uma pressão designada na câmara externa (jaqueta). O ar pode escapar e então sua válvula de liberação de vapor é fechada.

O revestimento quente aquece a câmara interna, aquecendo assim os materiais a serem esterilizados. Isso evita a condensação de vapor nos materiais. Agora, o vapor sob pressão é liberado do invólucro para a câmara interna e o ar pode escapar dele.

Então, sua válvula de liberação de vapor é fechada. O vapor sob pressão na câmara interna atinge temperaturas superiores a 100 ° C, que podem esterilizar os materiais mantidos no seu interior. A autoclave também possui sistema de fechamento automático, isto é, a menos que a temperatura e a pressão caiam próximas às condições da sala, a porta não pode ser aberta.

Além do mostrador de pressão, também possui um seletor de temperatura separado para indicar a temperatura dentro da câmara interna. Além disso, a autoclave mantém a temperatura e a pressão automaticamente e desliga após o tempo definido de esterilização.

4. Incubadora Microbiológica:

O crescimento profuso de micróbios é obtido em laboratório, cultivando-os em temperaturas adequadas. Isto é feito inoculando o micróbio desejado num meio de cultura adequado e depois incubando-o à temperatura ideal para o seu crescimento.

A incubação é feita em uma incubadora (Figura 3.7), que mantém uma temperatura constante especificamente adequada para o crescimento de um micróbio específico. Como a maioria dos micróbios patogénicos para o homem crescem profusamente à temperatura corporal do ser humano normal (ou seja, 37 ° C), a temperatura habitual de incubação é de 37 ° C.

A incubadora tem um termostato, que mantém uma temperatura constante, ajustada de acordo com a necessidade. A leitura da temperatura no termostato é aproximada. Temperatura precisa pode ser vista no termômetro fixado na incubadora. A temperatura exata, conforme a necessidade, é ajustada girando o botão do termostato por tentativa e erro e observando a temperatura no termômetro.

A maioria das incubadoras modernas (Figura 3.8) é programável, o que não requer ajuste de temperatura de tentativa e erro. Aqui, o operador define a temperatura desejada e o período de tempo necessário.

A incubadora automaticamente a mantém de acordo. A umidade é fornecida colocando-se um béquer de água na incubadora durante o período de crescimento. Um ambiente úmido retarda a desidratação da mídia e, portanto, evita resultados experimentais espúrios.

5. Incubadora de DBO (Incubadora de Baixa Temperatura):

Alguns micróbios devem ser cultivados a temperaturas mais baixas para fins específicos. A incubadora de baixa temperatura de DBO (Figura 3.9), que pode manter temperaturas de 50 ° C a tão baixas quanto 2-3 ° C, é usada para incubação em tais casos.

A temperatura desejada constante é ajustada girando o botão do termostato. A rotação do botão do termostato move uma agulha em um mostrador, mostrando a temperatura aproximada. Exata temperatura exigida é obtida, girando o botão finamente por tentativa e erro e observando a temperatura no termômetro fixado na incubadora.

A maioria das modernas incubadoras de BOD (Figura 3.10) são programáveis, que não precisam de configuração de temperatura de tentativa e erro. Aqui, o operador define a temperatura desejada e o período de tempo necessário. A incubadora automaticamente a mantém de acordo.

6. Geladeira (geladeira):

Ele serve como um repositório de produtos químicos, soluções, antibióticos, soros e reagentes bioquímicos termolábeis em temperaturas mais baixas e até mesmo em temperaturas abaixo de zero (a menos de 0 ° C). Culturas de estoque de bactérias também são armazenadas entre períodos de subcultura. Também é usado para o armazenamento de mídia esterilizada, de modo a evitar a desidratação.

7. Deep-frigorífico:

Ele é usado para armazenar produtos químicos e preservar amostras a temperaturas muito baixas abaixo de zero.

8. Balanço Eletrônico de Topo:

Ele é usado para pesar grandes quantidades de mídia e outros produtos químicos, onde a pesagem precisa não é de muita importância.

9. Balanço Analítico Eletrônico:

Ele é usado para pesar pequenas quantidades de produtos químicos e amostras com precisão e rapidez.

10. Balança Analítica de Panela Dupla:

É usado para pesar produtos químicos e amostras com precisão. Pesagem leva mais tempo, para o qual é usado apenas em situações de emergência.

11. Estação de Água Destilada:

A água é usada na preparação de meios e reagentes. Se os meios são preparados usando água da torneira, as impurezas químicas presentes podem interferir com o crescimento dos microorganismos na mídia. Além disso, quanto maior o conteúdo de bactérias da mídia, maior o tempo necessário para a esterilização e maior a chance de sobrevivência de algumas bactérias.

A água destilada, embora não seja livre de bactérias, contém menos bactérias. É por isso que; é preferido na preparação de meios microbiológicos. É também utilizado na preparação de reagentes, porque as impurezas químicas presentes na água da torneira podem interferir com o funcionamento adequado dos reagentes químicos.

Como a fabricação de água destilada pelo condensador Liebig é um processo de tomada de tempo, na maioria dos laboratórios, ela é preparada por “usinas de água destilada”. Normalmente, uma planta de água destilada é feita de aço ou latão. É também chamado de água destilada ainda.

Ele tem uma entrada para ser conectada à torneira de água e duas saídas, uma para a água destilada para cair em um recipiente e a outra para o fluxo de água quente para a pia. O ainda está instalado na parede. É aquecido por elementos de aquecimento elétrico embutidos (aquecedor de imersão).

O alambique funciona de forma eficiente, quando o fluxo de entrada de água é ajustado de tal forma que a temperatura da água de resfriamento que flui do alambique para a pia não é nem muito alta nem muito baixa, ou seja, a água quente deve fluir para fora. A água destilada pode conter traços de metais corroídos do recipiente de aço ou latão.

Para obter água destilada sem metal, é usado um aparelho de destilação de vidro e, ainda melhor, é um aparelho de destilação de quartzo. No entanto, para um laboratório de microbiologia, um aparelho de destilação de aço ou vidro é suficiente. Para análises de precisão, é utilizada água destilada dupla ou tripla.

12. Ultrapure Sistema de Purificação de Água:

Para trabalhos analíticos precisos, hoje em dia, em vez de usar água destilada dupla ou tripla, é utilizada água micro filtrada. No caso de água destilada, existe a possibilidade de que poucas substâncias voláteis presentes na água se volatilizem durante o aquecimento da água e, posteriormente, sejam condensadas na água destilada coletada.

Assim, pode haver traços de tais substâncias na água destilada. Para superar isso, a água ultrapura é usada. Aqui, a água pode passar por poros microscópicos muito finos, que retêm a partícula microscópica suspensa, incluindo os micróbios.

Então, a água passa por duas colunas de resinas de troca iônica. A resina de troca aniônica adsorve as legendas presentes na água, enquanto a resina de troca de legendas adsorve os ânions. A água que sai é extremamente pura.

13. Homogeneizador:

Para análise microbiológica, amostras líquidas são usadas diretamente, enquanto amostras sólidas devem ser misturadas com um diluente (geralmente soro fisiológico), de modo a obter uma suspensão homogênea de bactérias. Presume-se que esta suspensão contenha bactérias de forma homogênea.

A mistura de amostras sólidas e diluentes é feita por um homogeneizador, no qual um motor gira um impulsor com lâminas afiadas em alta velocidade dentro do copo homogeneizador fechado contendo a amostra e os diluentes. Tem um regulador de velocidade para controlar a velocidade de rotação do impulsor.

Em alguns laboratórios a mistura é feita manualmente por pilão e argamassa esterilizados. Em laboratórios modernos, é utilizado um saco descartável, dentro do qual a amostra sólida e os diluentes líquidos são colocados assepticamente e misturados mecanicamente pela ação peristáltica de uma máquina no saco. Esta máquina é chamada de stomacher.

14. medidor de pH:

Um medidor de pH é um instrumento para determinar o pH do meio líquido, amostras líquidas e tampões. Tem um eletrodo de pH de vidro. Quando não estiver em uso, deve ser mantido parcialmente imerso em água contida em um pequeno béquer e, de preferência, ser coberto por uma redoma para evitar o acúmulo de poeira na água e a perda de água por evaporação.

Antes de usar, o medidor é calibrado usando dois buffers padrão de pH conhecido. Normalmente buffers de pH 4.0, 7.0 e 9.2 estão disponíveis comercialmente. O instrumento é ligado e deixado por 30 minutos para aquecer. O botão de calibração de temperatura é girado para a temperatura das soluções cujo pH é medido.

Em seguida, o eletrodo é mergulhado no buffer (pH 7, 0). Se a leitura não for 7, 00, o botão de calibração do pH é girado até a leitura ser 7, 00. Então, o eletrodo é mergulhado em outro buffer (pH 4.0 ou 9.2).

Se a leitura for igual ao pH do buffer usado, o instrumento está funcionando corretamente. Caso contrário, o eletrodo é ativado mergulhando em 0, 1 N HC1 por 24 horas. Após a calibração, o pH das amostras é determinado mergulhando o eletrodo nelas e observando a leitura.

Toda vez, antes de mergulhar em qualquer solução, o eletrodo deve ser enxaguado com água destilada. As amostras não devem conter materiais pegajosos suspensos, que podem formar um revestimento na ponta do eletrodo e reduzir sua sensibilidade.

Os antigos medidores de pH modelo possuem eletrodos duplos (um deles atuando como eletrodo de referência), enquanto os novos modelos possuem eletrodo único combinado. Além disso, para superar o problema de correção de temperatura, agora estão disponíveis medidores de pH com correção automática de temperatura.

Aqui, outro "eletrodo de temperatura" também é colocado na solução, juntamente com o eletrodo de pH, que mede a temperatura da solução e corrige automaticamente a influência das variações de temperatura.

Medidores de pH sofisticados têm eletrodo de gel único. Esses eletrodos têm poucas chances de quebra, pois estão quase completamente fechados em um invólucro de plástico rígido, exceto na ponta. A ponta tem sensores de pH e temperatura.

Além disso, são de fácil manutenção, pois não exigem imersão constante em água destilada, pois a ponta do eletrodo é fechada com tampa de plástico contendo solução saturada de cloreto de potássio, quando não em uso. No entanto, na preparação de meios microbiológicos, o pH é determinado por papéis de pH de gama estreita e é ajustado ao pH requerido pela adição de ácidos ou álcalis, conforme necessário.

15. Placa quente:

A chapa quente é usada para aquecer produtos químicos e reagentes. A placa quente é feita de uma chapa de ferro, que é aquecida por um elemento de aquecimento elétrico por baixo. O grau requerido de aquecimento é obtido por um regulador.

16. Banho-maria com agitação:

Às vezes, o aquecimento a temperaturas muito precisas é necessário. Essas temperaturas precisas não podem ser obtidas em uma incubadora ou forno, em que a temperatura flutua, embora ligeiramente. No entanto, temperaturas precisas podem ser mantidas em banho-maria, o que proporciona uma temperatura estável.

Um banho de água consiste em um recipiente contendo água, que é aquecido por elementos de aquecimento elétrico. A temperatura da água requerida é obtida aumentando ou diminuindo a taxa de aquecimento girando o termostato por tentativa e erro.

Num banho-maria agitado, a substância é aquecida à temperatura desejada e, ao mesmo tempo, é agitada constantemente. A agitação é feita por um motor que gira e movimenta os recipientes para frente e para trás em cada rotação. A taxa de agitação é novamente controlada por um regulador. Agitando agita a substância e aumenta a taxa do processo.

A maioria dos banhos-maria modernos é programável e não precisa de configurações de temperatura de tentativa e erro. A temperatura desejada da água pode ser mantida durante um período de tempo desejado, programando-se de acordo. É usado para o cultivo de bactérias em meio de caldo a uma temperatura específica.

17. Balcão da Colônia de Quebec:

Na enumeração de bactérias em amostras, assume-se que uma única bactéria dá origem a uma única colônia visível, quando cultivada em uma placa de meio nutriente solidificado. Assim, contando o número de colônias, o número de bactérias em uma amostra pode ser estimado.

Às vezes, as colônias são muito pequenas e muito lotadas, dificultando a contagem. A contagem torna-se fácil quando se utiliza um contador de mão mecânica, chamado contador de colônias de Quebec (Figura 3.11). Ele divide a placa em várias divisões quadradas e as colônias são ampliadas 1, 5 vezes por uma lupa, o que facilita a contagem.

18. Contador Eletrônico de Colônias:

O contador de colônias eletrônicas é de dois tipos:

(1) contador de colônia eletrônica de mão e

(2) Contador de colônias eletrônicas de mesa.

O contador de colônias eletrônicas de mão é um balcão de colônia estilo caneta com um marcador de tinta com ponta de feltro. Para a contagem de colônias de bactérias cultivadas em uma placa de Petri, é mantido em uma posição invertida, de modo que as colônias são visíveis através da superfície inferior da placa de Petri.

As colônias são marcadas tocando a superfície de vidro da placa de Petri com a ponta de feltro do balcão da colônia. Assim, cada colônia é marcada por um ponto feito pela tinta da ponta de feltro na superfície inferior da placa de Petri. Em um único movimento, o contador de colônias eletrônicas marca, conta e confirma com um som de bipe.

A contagem cumulativa de colônias é exibida em um display de LED de quatro dígitos. No caso do contador de colônias eletrônicas de mesa, a placa de Petri contendo as colônias de bactérias é colocada em um palco iluminado e a barra de contagem é pressionada. O número exato de colônias é instantaneamente exibido em uma leitura digital.

19. agitador magnético:

Na preparação de soluções, certos produtos químicos requerem agitação por longo tempo, para serem dissolvidos em certos solventes. Agitador magnético é usado para dissolver essas substâncias com facilidade e rapidez. Um pequeno ímã revestido de teflon, chamado “barra de agitação”, é colocado em um recipiente contendo o solvente e o soluto.

Em seguida, o recipiente é colocado na plataforma do agitador magnético, abaixo do qual um ímã gira em alta velocidade por um motor. Atraído pelo ímã giratório, o ímã revestido de teflon gira dentro do contêiner e agita o conteúdo. Agora, o soluto se dissolve rapidamente.

O revestimento de teflon evita que o ímã reaja com a solução, que entra em contato com ele. Após a dissolução completa, o ímã revestido de teflon é removido da solução por meio de um longo retriever, chamado de "removedor de barra de agitação".

20. Sonicator:

É usado para romper células usando ondas de alta frequência.

21. Misturador Vortex:

É um instrumento usado para a mistura completa de líquidos em tubos de ensaio. Tem um rotor, cuja velocidade pode ser controlada. Na ponta do rotor é um top de espuma de borracha. Quando o fundo de um tubo de ensaio é pressionado sobre este topo de borracha de espuma, o rotor começa a rodar, rodando assim o fundo do tubo de ensaio a alta velocidade.

Devido à força centrípeta, a solução é misturada completamente. É particularmente útil durante a diluição em série na enumeração de bactérias, que necessitam de suspensão homogênea de células de bactérias.

21. Câmara de Fluxo Laminar:

É uma câmara (Figura 3.12) utilizada para transferência asséptica de materiais esterilizados, bem como para inoculação de micróbios. Partículas de poeira flutuando nos micróbios do porto. Essas partículas de poeira carregadas de micróbios podem entrar nos meios esterilizados e contaminá-los, quando são abertos por curtos períodos de tempo durante a inoculação do micróbio ou transferidos de um recipiente para outro.

Para superar isso, quando a inoculação é feita ao ar livre, o ar da pequena área de inoculação é esterilizado pela chama de um bico de bunsen. O ar aquecido se torna leve e se move para cima, evitando que as partículas de poeira caiam na mídia durante o curto processo de abertura.

Para reduzir ainda mais a chance de contaminação pelo ar carregado de micróbios, é utilizada uma câmara de fluxo laminar. É uma câmara cuboidal de vidro. Um soprador de ar sopra o ar do ambiente e passa-o através de um filtro HEPA (Filtro de Partículas de Alta Eficiência), de modo a torná-lo livre de poeira (livre de micróbios).

Este ar isento de micróbios atravessa a câmara de uma maneira laminar e sai da câmara através da porta da frente aberta. Este fluxo laminar de ar isento de micróbios da câmara para o exterior através da porta aberta evita que o ar exterior entre na câmara.

Assim, a câmara não é contaminada com os micróbios presentes no ar exterior, embora a porta seja mantida aberta durante a inoculação ou transferência de meios. Uma lâmpada UV instalada dentro da câmara esteriliza a câmara antes da operação.

Tem uma plataforma de aço inoxidável com provisão para conexão de tubulação de gás para um queimador de bunsen. Antes do uso, a plataforma é limpa e desinfetada com lisol, o bico de bunsen é conectado e a porta de vidro é fechada.

A luz UV é ligada por 10 minutos para esterilizar o ambiente dentro da câmara e depois desligada. A porta de vidro nunca deve ser aberta quando a luz UV estiver acesa, porque a luz UV tem um efeito prejudicial sobre a pele e a visão. O soprador é ligado e a porta de vidro é aberta.

Agora, o queimador de bunsen é iluminado e a transferência de mídia ou inoculação é realizada na câmara de forma asséptica. Se micróbios extremamente perigosos forem manuseados, uma câmara de fluxo laminar com luvas projetando-se para a câmara a partir da porta de vidro frontal é usada, pois a inoculação deve ser feita mantendo a porta da frente fechada.

22. Contador Eletrônico de Células:

É usado para contar diretamente o número de bactérias em uma determinada amostra líquida. Um exemplo de contador de células eletrônicas é o "contador Coulter". Neste equipamento, uma suspensão de células bacterianas é permitida a passagem através de um minúsculo orifício, através do qual uma corrente elétrica flui.

A resistência no orifício é registrada eletronicamente. Quando uma célula passa pelo orifício, sendo não-condutor, aumenta momentaneamente a resistência. O número de vezes que a resistência aumenta momentaneamente é registrada eletronicamente, o que indica o número de bactérias presentes na amostra líquida.

23. Aparelho de Filtração por Membrana:

Certas substâncias como a ureia se desintegram e perdem suas propriedades originais, se esterilizadas pelo calor. Tais substâncias são esterilizadas por aparelho de filtração por membrana. Neste aparelho, a solução da substância a ser esterilizada é filtrada através de um filtro de membrana, que não permite a passagem de células bacterianas. A filtração é feita sob pressão de sucção para aumentar a taxa de filtração (Figura 2.19, página 30).

24. Microscópios:

Diferentes tipos de microscópios são usados ​​para observação visual de morfologia, motilidade, coloração e reações fluorescentes de bactérias.

25. Computadores:

Os computadores geralmente são usados ​​para análise de resultados. Eles também são usados ​​para identificação de bactérias facilmente dentro de poucas horas. Caso contrário, a identificação de bactérias é um processo tedioso e leva dias juntos para identificar uma espécie de bactéria.

Os computadores usados ​​para identificação de bactérias são Apple II, IBM PC e TRS-80 e suas variantes modernas. Cada pessoal de pesquisa do laboratório deve ser fornecido com um computador, juntamente com facilidade de internet.

26. Espectrofotômetro:

É um instrumento para medir as diferenças nas intensidades de cor das soluções. Um feixe de luz de um determinado comprimento de onda é passado através da solução de teste e a quantidade de luz absorvida (ou transmitida) é medida eletronicamente.

Um espectrofotômetro simples e visível pode passar a luz com comprimentos de onda dentro da faixa visível, enquanto um espectrofotômetro UV-visível pode passar luz com comprimentos de onda na faixa ultravioleta assim como visível. No laboratório de microbiologia, é usado para contagem direta de bactérias em suspensão, bem como para outros fins.

27. Dispositivos Elétricos:

A flutuação da tensão elétrica no laboratório é uma das razões mais importantes, o que reduz a longevidade dos equipamentos e às vezes os danifica. Portanto, todos os equipamentos sensíveis à tensão devem ser providos de dispositivos de proteção de tensão como estabilizadores, servo estabilizadores ou transformadores de tensão constante (CVT) conforme as recomendações dos fabricantes dos equipamentos.

Computadores, balanças e alguns equipamentos sofisticados devem ser conectados através de uma fonte de alimentação ininterrupta (UPS), pois qualquer falha no fornecimento de energia elétrica durante a operação pode danificar gravemente alguns de seus componentes sensíveis.

O laboratório deve ter um gerador de alta capacidade para fornecer corrente elétrica a todo o laboratório em caso de falha de energia. Isso porque, a falta de energia não apenas paralisa as atividades do laboratório, mas também provoca mudanças irreversíveis indesejáveis ​​nas amostras armazenadas nas geladeiras e refrigeradores.

28. Sistema Automático de Identificação de Bactérias:

É um instrumento utilizado para identificação automática assistida por computador de bactérias (Figuras 3.13 e 3.14). O método convencional de identificação de bactérias é muito demorado e pesado.

Envolve principalmente coloração, teste de motilidade, características culturais, uma série de testes bioquímicos e, finalmente, pesquisando o nome das bactérias no 'Manual de Bacteriologia Determinante de Bergey', comparando os resultados com aqueles disponíveis no manual. O sistema automático de identificação de bactérias identifica automaticamente as bactérias em muito pouco tempo.

O sistema, como o VITEK 2 (Figura 3.14), usa cartões descartáveis. Um cartão é necessário para a identificação de uma bactéria. O sistema pode acomodar uma série de cartões, que podem ser dispostos em um cassete, permitindo a identificação de várias bactérias ao mesmo tempo.

Cada cartão tem várias linhas de poços. Normalmente existem 8 filas de 8 poços cada (8X8 = 64 poços). Os poços contêm diferentes meios desidratados necessários para diferentes testes bioquímicos. Um tubo capilar é fixado em cada cartão, o que suga a suspensão de bactérias a ser identificada e distribui todos os poços.

Os meios desidratados nos poços tornam-se hidratados pelo líquido em suspensão, permitindo assim o crescimento das bactérias. Após um período de incubação prescrito, as mudanças de cor em todos os poços são registradas automaticamente no sistema.

Os resultados das mudanças de cor vão para um computador conectado ao sistema. O computador compara automaticamente os resultados com aqueles disponíveis em sua biblioteca para diferentes bactérias e, finalmente, dá o nome da bactéria com uma probabilidade definida.

Para identificação, as bactérias dadas, crescidas como colônia isolada em uma placa ou como cultura pura cultivada em uma inclinação são tomadas. Uma polpa da bactéria é transferida assepticamente para uma solução salina estéril em um tubo de ensaio e uma suspensão da bactéria é feita.

A suspensão deve conter uma densidade prescrita de bactérias, conforme determinado por um densitômetro. O tubo de ensaio é fixado ao cassete e um cartão é fixado próximo a ele, de forma que a ponta do tubo capilar de sucção do cartão permaneça profundamente submersa na suspensão.

Vários desses tubos de ensaio e cartões são fixados em cada cassete, dependendo do número de bactérias a serem identificadas. A cassete é colocada na câmara de vácuo do sistema. Um alto vácuo é criado dentro da câmara, o que força a suspensão de bactérias a ser sugada para dentro dos tubos capilares e distribuída para os poços dos cartões.

A cassete é retirada e colocada dentro da câmara de incubação e análise. Aqui, os tubos capilares são cortados e as extremidades cortadas são seladas automaticamente. Então, o processo de incubação começa a uma temperatura prescrita por um período de tempo prescrito, que é programado pelo painel de controle. Durante a incubação, a cada 15 minutos, cada cartão vai automaticamente para o leitor de cores, que lê as mudanças de cor nos poços e registra-os.

Os resultados registrados vão para o computador, que os compara automaticamente com os resultados, disponíveis em sua biblioteca para diferentes bactérias. Finalmente, dá os nomes das bactérias com probabilidades definidas. Os cartões usados ​​caem na câmara de eliminação de resíduos do sistema para remoção e disposição final após a esterilização.

Os renomados sistemas automáticos de identificação de bactérias são o VITEK 2 e o API. Enquanto o VITEK 2 trabalha com o princípio acima, o sistema API (Analytical Profile Indexing) (Figura 3.13) usa um método ligeiramente diferente para a identificação automática de bactérias, que envolve inoculação manual e incubação externa.

29. Termociclador por PCR, Centrífuga Refrigerada, Ultra-centrífuga, Cromatografia Gasosa (GC), Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC), Cromatografia em Camada Delgada (TLC), Cromatografia em Papel, Cromatografia em Coluna e Unidade de Eletroforese:

São instrumentos utilizados para isolamento, purificação e identificação de substâncias bioquímicas, como DNA bacteriano, plasmídeos, toxinas microbianas etc. A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma ferramenta importante em métodos baseados em ácidos nucléicos. É um burro de carga nos laboratórios modernos de microbiologia e biotecnologia.