Clonagem de Genes: Principais Passos Envolvidos na Clonagem de um Gene

Gene Cloning: Principais etapas envolvidas na clonagem de um gene!

“Transferência nuclear de células somáticas” ou simplesmente “transferência nuclear”, requer dois tipos de células. Uma é uma célula somática, que é coletada do animal a ser clonado, que o método de clonagem mais comum é conhecido como “doador genético”.

Uma célula somática é qualquer célula que não seja um espermatozoide ou óvulo, e contém o DNA completo, ou projeto genético, do animal de onde veio. Para fins de clonagem, as células somáticas são tipicamente obtidas por uma biópsia de pele de rotina realizada por um veterinário.

A célula necessária para a clonagem é uma célula-ovo, que é coletada de uma fêmea da mesma espécie (conhecida como “doadora de óvulos”). No laboratório, um cientista extrai e descarta o núcleo do óvulo, que é a parte da célula que contém os genes do doador de óvulos. Em seguida, insere-se a célula somática do doador genético no óvulo e “funde” os dois com eletricidade. Consequentemente, o óvulo fundido contém o DNA do doador genético.

A simulação científica do óvulo fundido “ativa” o óvulo e faz com que ele se divida como um ovo, se tivesse sido fertilizado por um espermatozóide na reprodução convencional. O ovo ativado é então colocado em um meio de cultura. Como a divisão celular continua ao longo de vários dias, um blastocisto (embrião em estágio inicial) se forma.

Após cerca de uma semana, um especialista em transferência de embriões transfere o blastocisto para uma fêmea receptora (às vezes chamada de “mãe substituta”), onde continua a se desenvolver. Após uma gravidez a termo, o receptor dá à luz um animal que é essencialmente o gêmeo idêntico do doador genético.

Os principais passos envolvidos na clonagem de um gene são:

(i) Preparao de DNA portador (vector DNA).

(ii) Isolamento do gene desejado.

(iii) Inserção do gene isolado no vetor que resulta no rDNA.

(iv) Transformação do ADNr num hospedeiro adequado.

(v) Expressão de ADNr que é gene clonado.

As imagens coloridas 7.1 (a), (b), (c), (d) e (e) mostram a criação de Dolly. As células retiradas do úbere de uma ovelha Finn Dorset são colocadas numa cultura com concentrações muito baixas de nutrientes. Assim, famintos, as células param de se dividir e desligam seus genes ativos.

As duas células são colocadas uma ao lado da outra e um pulso elétrico faz com que elas se fundam como bolhas de sabão. Um segundo pulso imita a explosão de energia na fertilização natural, iniciando a divisão celular. Após cerca de seis dias, o embrião resultante é implantado no útero de outra ovelha Blackface.

Após um período de gestação, a ovelha Blackface grávida dá à luz um filhote de cordeiro Finn Dorset, chamado Dolly, que é geneticamente idêntico ao doador original. O processo operado pelo homem de extrair DNA de uma célula hospedeira e implantá-lo para funcionar em outro tipo de célula.