Experiência para medir o tamanho de microorganismos sob microscópio (com figura)

Experiência para medir o tamanho de microorganismos sob o microscópio!

Objetivo:

Micrometria (micro: microscópica, metragem: medição) é a medida das dimensões dos objetos microscópicos em termos de comprimento, largura, diâmetro e espessura. Os microorganismos são objetos microscópicos, pois não são visíveis a olho nu e só podem ser observados ao microscópio.

Muitas vezes, é necessário medir suas dimensões em termos de comprimento, largura e diâmetro. Por causa de seu tamanho diminuto, a medição de suas dimensões deve ser feita sob microscópio. Assim, o objetivo da micrometria é medir as dimensões dos microorganismos sob o microscópio.

Princípio:

A medição das dimensões dos microrganismos é feita sob microscópio com a ajuda de duas micro-escalas chamadas 'micrômetros'. Ambos os micrômetros têm graduações microscópicas gravadas em suas superfícies. Um deles, o 'micrômetro ocular' é um disco de vidro circular, que se encaixa na prateleira circular dentro da ocular.

Tem graduações arbitrárias gravadas em sua superfície. No entanto, a distância entre as graduações gravadas é constante para um micrômetro ocular específico. O outro micrômetro, chamado 'micrômetro de estágio', é uma lâmina de vidro especial, que é presa ao estágio do microscópio. Tem graduações padrão gravadas em sua superfície, separadas por 10 µm.

Calibração:

Usando o objetivo requerido, as graduações no micrômetro ocular são calibradas contra as graduações padrão no micrômetro do estágio. A calibração é necessária, porque a distância entre as graduações oculares varia dependendo do objetivo sendo usado, o que determina o tamanho do campo.

Para calibração, ambos os gravados do micrômetro são sobrepostos pela rotação da ocular. O número de divisões oculares (OD) coincidindo com o número de divisões de palco (SD) é descoberto.

A partir daí, o fator de calibração para uma divisão ocular (DO) é calculado da seguinte forma:

Se 10 OD coincidirem com 2 SD, então

10 DO = 2 DP = 2 x 10 µ = 20 µ (… 1 DP = 10 µ)

1 DO = 20/10 µ = 2 µ

Assim, a distância entre duas gravações oculares adjacentes é de 2 µ (isto é, o fator de calibração é 2 µ).

Medição:

Após a calibração, o micrômetro do estágio é removido e o micróbio, cujas dimensões devem ser medidas, é colocado no palco em uma lâmina e focalizado. Agora, o número de divisões oculares ocupadas pelo microorganismo é contado. Então, multiplicando esse número de divisões pelo fator de calibração, o tamanho do micróbio é determinado da seguinte maneira.

Se o micróbio ocupa 6 OD de comprimento, então o comprimento do micróbio = 6 x fator de calibração = 6 x 2 = 12 µ.

É possível medir o tamanho dos micróbios observando-os diretamente em um micrômetro de estágio. Isso evitaria calibração e cálculos. Mas o micrômetro do estágio é uma escala padrão, que é cara devido às micro gravuras nele contidas. Se usado com freqüência para observação direta, suas gravuras se desgastam.

Além disso, as gravuras no micrômetro de estágio são mais espaçadas (cerca de 10 vezes) do que as do micrômetro ocular. Assim, as dimensões não podem ser determinadas com precisão com um micrômetro de estágio. É por isso que; nunca é usado para medição direta.

Materiais requisitados:

Micrômetro ocular, micrômetro de estágio, slide, microscópio, micróbio.

Procedimento:

1. A ocular é removida do microscópio e sua tampa superior é desparafusada. A tampa é removida. Com cuidado, a lente do olho (Figura 5.15) é removida. O micrómetro ocular (uma peça circular de vidro gravado, que desliza para dentro da peça do olho) é colocado cuidadosamente na ocular. A lente do olho é colocada de volta e a tampa superior é parafusada à sua condição original. A ocular é colocada de volta no microscópio.

2. O micrômetro de estágio é preso ao palco e as gravuras são centradas movendo-se o estágio mecânico.

3. O objetivo de baixa potência é levado para a posição.

4. A ocular é rodada até que as gravações em ambos os micrómetros se sobreponham.

5. O objetivo requerido é levado a posição. O objetivo requerido é que, usando todo o microorganismo que pode ser visto e cobre o campo microscópico na máxima extensão possível.

6. Com o objetivo desejado na posição (para o objetivo de imersão em óleo, uma gota de óleo é colocada no micrômetro do estágio) o estágio mecânico é movido, de modo que uma linha no micrômetro do estágio coincida com uma linha no micrômetro ocular. Em seguida, outra linha é pesquisada no micrômetro ocular, que coincide com outra linha no micrômetro do palco. O número de divisões entre as linhas coincidentes é contado para ambos os micrômetros.

7. O fator de calibração para o objetivo usado é calculado.

8. De maneira semelhante, os fatores de calibração são calculados para os outros objetivos.

9. O micrômetro do estágio é removido.

10. O slide contendo o micróbio a ser observado é colocado no palco e focalizado.

11. O número de divisões oculares cobertas pelo micróbio é contado pela visualização através da ocular.

12. O tamanho do microrganismo é determinado pela multiplicação do número de divisões oculares cobertas pelo micróbio pelo fator de calibração.