Diferentes produtos químicos e meios utilizados em um laboratório de microbiologia

Diferentes produtos químicos e meios utilizados em um laboratório de microbiologia!

No laboratório, as bactérias são cultivadas em substâncias ricas em nutrientes chamadas 'media'. Uma variedade de mídias também é necessária para usos específicos.

Os componentes da mídia são pesados ​​em uma determinada proporção, misturados na quantidade necessária de água e esterilizados em autoclave. As bactérias são inoculadas e deixadas crescer.

Pesando os ingredientes da mídia é um trabalho tedioso e alguns ingredientes podem ser perdidos sem saber. Para superar essa dificuldade, agora estão disponíveis mídias prontas para uso em pó.

Esses meios contêm todos os ingredientes nas proporções prescritas. Para uma quantidade definida do meio em pó (como mencionado no rótulo da embalagem), a quantidade especificada de água é adicionada e esterilizada.

Os meios de cultura são dos seguintes tipos:

I. Meios Quimicamente Definidos:

Meios quimicamente definidos ou meios sintéticos são os meios, nos quais todas as substâncias químicas específicas (moléculas e átomos) e suas concentrações podem ser determinadas. Os químicos podem incluir H2O, NaCl, Na2S04, KCl e ágar. Exemplos: caldo sintético inorgânico, caldo de sal de glicose.

II. Mídia Complexo:

Mídia complexa é a mídia, na qual todas as substâncias químicas específicas (moléculas e átomos) e suas concentrações não podem ser determinadas. Para bactérias fastidiosas, poucas substâncias complexas, como extrato de carne, extrato de levedura e peptona, são usadas na mídia, cuja composição química exata (moléculas e átomos) varia consideravelmente e não é conhecida. Estes meios são usados ​​principalmente para o crescimento profuso de bactérias. Exemplos: caldo nutriente e nutriente ágar.

III Mídia Especializada:

Estes meios são utilizados para fins específicos, e não apenas para o crescimento de bactérias.

Com base no propósito de uso, eles são dos seguintes tipos:

1. Mídia Seletiva:

Eles são a mídia contendo uma composição específica de ingredientes, que suporta o crescimento de algumas bactérias-alvo e inibe o crescimento das outras. Eles são usados ​​para isolar grupos específicos de bactérias.

Quando um determinado grupo de bactérias cresce em meio seletivo, manifesta características típicas de colônias, que auxiliam na sua detecção e enumeração em várias amostras. As bactérias particulares de interesse, encontradas como colônias isoladas, são tomadas para testes adicionais para identificação confirmada. Às vezes, as mídias seletivas também são usadas como mídia diferencial.

Os exemplos de mídia seletiva são fornecidos abaixo:

(a) MacConkey Agar:

É usado para cultivar espécies gram-negativas de bactérias. O cristal violeta usado no meio inibe o crescimento de bactérias gram-positivas, enquanto permite que as espécies gram-negativas cresçam.

b) Ágar EMB:

O agar de eosina-metileno-azul (EMB agar) é utilizado para cultivar espécies gram-negativas de bactérias. Inibe parcialmente o crescimento de bactérias gram-positivas, devido às quais as espécies gram-negativas de bactérias crescem nela mais profusamente. Ele também é usado na identificação da coli entérica forma Escherichia coli, que cresce sobre ela como colônias azul-preto com um brilho verde metálico.

Outros coliformes entéricos, como o Enterobacter aerogenes, crescem nele como colônias grossas, mucoides e cor-de-rosa. Além desses fomentadores de lactose, também não crescem lactose-fomentadores, mas como colônias incolores, para as quais assumem a cor púrpura do meio.

c) Agar sal manitol:

É usado para crescer Staphylococcus spp. A alta concentração de sal (7, 5% NaCl) presente no meio inibe o crescimento da maioria das outras bactérias. Também diferencia Staphylococcus em Staphylococcus fermentadores de manitol, que crescem com zonas amarelas ao redor das colônias e Staphylococcus não fermentadores de manitol, que crescem sem alteração na coloração.

2. Mídia Diferencial:

Eles são a mídia, na qual diferentes bactérias crescem como colônias, com diferentes características visuais.

Os exemplos de mídia diferencial são fornecidos abaixo:

(a) MacConkey Agar:

Neste meio, as bactérias intestinais normais não patogênicas, que são fermentadores de lactose, crescem como colônias vermelhas, enquanto as bactérias intestinais patogênicas, que são não-fermentadoras de lactose, crescem como colônias incolores.

b) Ágar Sangue:

O sangue é o constituinte importante deste meio. É um ingrediente de enriquecimento para as bactérias fastidiosas como o Streptococcus spp.

É usado para diferenciar as propriedades dos estreptococos para produzir diferentes tipos de hemólise do sangue da seguinte forma:

(i) α-hemólise:

Aqui, ocorre a destruição parcial de eritrócitos, resultando em zonas de cor verde ao redor das colônias devido à redução da hemoglobina em metemoglobina.

(ii) β-hemólise:

Aqui, hemólise completa de hemácias ocorre, resultando em zona clara ao redor das colônias. Esta hemólise é constituída por dois tipos de hemolisinas, a saber, a estreptolisina O, que é uma enzima antigénica lábil ao oxigénio e a estreptolisina S, que é uma lisina não antigénica estável ao oxigénio.

(iii) hemólise de y:

Aqui, nenhuma hemólise ocorre, resultando em nenhuma zona ao redor das colônias.

3. Mídia de Transporte:

Eles são os meios utilizados para o transporte de bactérias, durante os quais o crescimento é indesejável. Esses meios contêm apenas buffer e sal. A mídia não contém nenhuma fonte de C, N e outros fatores de crescimento. Evita o crescimento microbiano.

4. Mídia de Enriquecimento:

Eles são a mídia, na qual a proporção relativa das bactérias-alvo é enriquecida, pois elas contêm os nutrientes para as bactérias-alvo, enquanto nenhuma para as outras. Por exemplo, a matéria fecal contém um número muito baixo de Salmonella e Shigella.

Para isolá-los, eles são primeiramente cultivados em caldo de selenito ou GN (gram-negativo), nos quais apenas Salmonella e Shigella crescerão profusamente, enquanto outros não crescerão e permanecerão em fase de defasagem. Então, este é riscado em meios sólidos para obter colônias de Salmonella e Shigella.

5. Mídia Enriquecida:

Eles são os meios utilizados para apoiar o crescimento de tipos máximos de bactérias.

6. Mídia Bioquímica:

Estes meios são utilizados para testar atividades bioquímicas de bactérias, que ajudam na sua identificação. Uma lista de importantes meios bioquímicos usados ​​nos testes bioquímicos realizados para a identificação de diferentes bactérias é fornecida abaixo.